Мошини пурра худкори истихроҷ ва муайянкунандаи кислотаи нуклеинӣ аз New Tech

Панҷ қувва:
● Асбоб бо истихроҷи кислотаи нуклеинӣ ва марҳилаи тозашуда танзим карда шудааст
● Асбоб, ки бо модули истихроҷи ултрасадо танзим шудааст
● Асбоб бо пурра автоматӣ танзим карда шудааст
● Асбоб бо тақвияти ҳарорати тағйирёбанда танзим карда шудааст
● Асбоб бо маҷмӯаи реагенти пурраи пӯшида танзим карда шудааст

1. Оё реагентҳои муайянкунандаи кислотаи нуклеинӣ бояд истихроҷ ва тоза карда шаванд?
Принсипи муайянкунии кислотаи нуклеинӣ чунин аст: зери таъсири праймер полимеразаи ДНК барои амплификацияи реаксияи занҷирӣ дар қолаби ДНК/РНК (транскрипсияи баръакси NA талаб карда мешавад) истифода мешавад ва сипас барои муайян кардани миқдори сигнали флуоресценти баровардашуда муайян карда мешавад. ки оё намуна дорои кислотаи нуклеинӣ (ДНК/РНК)-и патогени ошкоршаванда аст.

1) Намунаҳое, ки истихроҷ карда нашудаанд ё тоза карда нашудаанд, метавонанд ҷузъҳои зиёде дошта бошанд, ки ба натиҷаи ниҳоӣ таъсир мерасонанд: нуклеаза (ки метавонад кислотаи нуклеини мақсаднокро пароканда кунад ва боиси манфии бардурӯғ гардад), протеаза (ки метавонад полимерази ДНК-ро коҳиш диҳад ва манфии бардурӯғро ба вуҷуд орад), металлҳои вазнин намак (ки ба ғайрифаъолшавии синтаза оварда мерасонад ва боиси мусбати бардурӯғ мегардад), аз ҳад зиёд туршӣ ё аз ҳад сілтӣ PH (ки метавонад боиси нокомии реаксия гардад), РНК-и нопурра (ба нокомии транскрипсияи манфии бардурӯғ оварда мерасонад).

2) Баъзе намунаҳоро мустақиман афзоиш додан душвор аст: Грам-мусбат ва баъзе паразитҳо аз сабаби девори ҳуҷайраҳои ғафс ва дигар сохторҳо, агар онҳо аз раванди истихроҷ ва тозакунии кислотаи нуклеинӣ нагузаранд, маҷмӯаи бидуни экстраксия барои инҳо корношоям мешавад. намунаҳо.

Аз ин рӯ, тавсия дода мешавад, ки маҷмӯаи санҷишӣ ё асбоберо, ки бо марҳилаи истихроҷи кислотаи нуклеинӣ танзим карда шудааст, интихоб кунед.

2. Истихроҷи кимиёвӣ ё истихроҷи фрагментатсияи физикии ултрасадо?
Умуман, истихроҷи кимиёвӣ метавонад ба аксари коркарди пешакӣ ва тозакунӣ татбиқ карда шавад.Бо вуҷуди ин, дар бактерияҳои ғафси грам-мусбат ва баъзе паразитҳо, инчунин чунин ҳолат вуҷуд дорад, ки истихроҷи кимиёвӣ қолабҳои кислотаи нуклеинро ба даст оварда наметавонад, ки дар натиҷа манфии бардурӯғ пайдо мешавад.Илова бар ин, истихроҷи кимиёвӣ аксар вақт агентҳои пурқувватро истифода мебарад, агар эллюсия ҳамаҷониба набошад, ба системаи реаксия ишқори қавӣ ворид кардан осон аст, ки дар натиҷа натиҷаҳои нодуруст ба даст меоранд.

Тақсимоти ултрасадо шикастани ҷисмониро истифода мебарад, ки аз ҷониби GeneXpert, як корхонаи пешқадам дар соҳаи POCT барои истифодаи инсон бомуваффақият истифода шудааст ва дар истихроҷи кислотаи нуклеин аз баъзе намунаҳои мураккаб (ба монанди Mycobacterium tuberculosis) бартарии мутлақ дорад.

Аз ин рӯ, тавсия дода мешавад, ки маҷмӯаи озмоишӣ ё асбоберо интихоб кунед, ки бо марҳилаи истихроҷи кислотаи нуклеинӣ танзим карда шудааст.ва он беҳтарин аст, агар модули истихроҷи ултрасадо вуҷуд дошта бошад.

3. Дастӣ , Ним автоматӣ ва пурра автоматӣ?
Ин проблемаи арзиши мехнат ва самаранокии кор аст.Дар айни замон, беморхонаҳои ҳайвоноти хонагӣ бе кормандони кофӣ ва истихроҷ ва муайян кардани кислотаи нуклеинӣ корест, ки малака ва таҷрибаи муайянро талаб мекунад.Шубҳае нест, ки мошини комилан автоматии истихроҷ ва муайянкунии кислотаи нуклеинӣ интихоби комил аст.

4. Амплификатсияи доимии ҳарорат ё амплификатсияи ҳарорати тағйирёбанда?
Реаксияи амплификатсия як пайванди муайянкунии кислотаи нуклеинӣ мебошад ва технологияи касбии дар ин пайванд алоқаманд мураккаб аст.Тахминан, ферментҳо барои тақвият додани кислотаи нуклеин истифода мешаванд.Дар ҷараёни пурзӯркунӣ сигнали пурқувватшудаи флуоресцентӣ ё сигнали флуорессенси дарунсохт муайян карда мешавад.Умуман, сигнали флуоресцентӣ ҳар қадар барвақттар пайдо шавад, мундариҷаи генҳои мавриди ҳадаф дар намуна зиёдтар мешавад.

Амплификатсияи доимии ҳарорат ин амплификацияи кислотаи нуклеинӣ дар ҳарорати муқарраршуда мебошад, дар ҳоле ки амплификацияи ҳарорати тағйирёбанда амплификацияи давравӣ аст, ки ба таври қатъӣ мувофиқи денатуратсия-тавсифкунӣ-тавсия мебошад.Вақти амплификатсияи доимии ҳарорат гузаронида шуд, дар ҳоле ки ба вақти амплификатсияи тағйирёбандаи ҳарорат ба суръати баландшавӣ ва пастшавии ҳарорат таъсири калон мерасонад (дар айни замон, бисёр истеҳсолкунандагон тавонистанд, ки дар тӯли тақрибан 30 дақиқа 40 даври пурқувваткуниро иҷро кунанд).

Агар шароити лабораторӣ хуб бошад ва минтақабандӣ сахт бошад, гуфтан оқилона аст, ки фарқияти дақиқии байни ин ду он қадар зиёд нахоҳад буд.Бо вуҷуди ин, амплификацияи ҳарорати тағйирёбанда дар муддати нисбатан кӯтоҳтар маҳсулоти бештари кислотаи нуклеинро синтез мекунад.Барои лабораторияҳое, ки бе минтақаҳои сахтгир ва кормандони таълими касбӣ надоранд, хатари хуруҷи аэрозолҳои кислотаи нуклеинӣ бештар хоҳад буд, пас аз хуруҷ мусбати бардурӯғ пайдо мешавад ва бартараф кардани он ниҳоят душвор аст.

Илова бар ин, амплификацияи ҳарорати доимӣ ҳангоми мураккаб будани намуна (ҳарорати нисбии реаксия пасттар аст ва ҳарорати васеъшавӣ ҳар қадар баландтар бошад, мушаххасоти бастабандии праймер ҳамон қадар беҳтар аст) ба амплификатсияи ғайримуқаррарӣ бештар майл дорад.

То он даме, ки технологияи кунунӣ дахл дорад, амплификатсияи ҳарорати тағйирёбанда боэътимодтар аст.

5. Чӣ тавр аз хатари ихроҷи маҳсулоти ампликатсияи кислотаи нуклеинӣ канорагирӣ кардан мумкин аст?
Дар айни замон, бисёр истеҳсолкунандагон найчаи ғадудҳои навъи ПТР-ро ҳамчун найчаи реаксияи кислотаи нуклеинӣ интихоб мекунанд, ки бо соиш баста мешавад ва денатуратсияи ҳарорат дар денатуратсияи ҳарорати тағйирёбанда дар амплификатсияи ҳарорати тағйирёбандаи PCR ба 90 дараҷа мерасад.
Сантиград.Раванди такрории васеъшавӣ бо гармӣ ва ихтисоршавӣ бо хунукӣ барои мӯҳр задани найчаи PCR як мушкили бузург аст ва найчаи ғадуди навъи ПЗР боиси ихроҷ шуданаш нисбатан осон аст.

Беҳтар аст, ки реаксияро бо маҷмӯа/найчаи комилан мӯҳрдор қабул кунед, то аз ихроҷи маҳсулоти реаксия пешгирӣ карда шавад.Агар маҷмӯаи пурраи мӯҳрдор барои истихроҷ ва ошкор кардани кислотаи нуклеинӣ кор карда шавад, комил мебуд.

Ҳамин тавр, мошини нави комилан автоматии истихроҷ ва муайянкунии кислотаи нуклеинии New Tech дорои панҷ интихоби беҳтарини дар боло зикршуда мебошад.